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分子診斷所應用到的分子生物學(xué)技術(shù)主要包括,聚合鏈式反應(PCR),熒光定量PCR(qPCR),DNA測序(DNA Sequencing),熒光原位雜交(FISH),DNA印記技術(shù)(DNA Blotting),單核酸多態(tài)性(SNP)和基因芯片(Gene Chip)等技術(shù)。這些技術(shù)的操作都離不開(kāi)一個(gè)重要的物質(zhì) – 核酸(DNA和RNA)。而由于日常檢測中要處理大量的不同來(lái)源的核酸以及核酸本身難以降解的特性,核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性的檢測結果,這樣會(huì )對病人造成誤診,耽誤病情。如任由此情況發(fā)展,會(huì )形成氣溶膠污染而擴散,會(huì )導致整個(gè)實(shí)驗室的污染,嚴重的會(huì )關(guān)閉實(shí)驗室,如無(wú)備用實(shí)驗室,會(huì )造成更大的損失。
在與核酸污染長(cháng)期抗爭中,人們也總結出了一些預防和清除核酸污染的方法。對于預防,實(shí)驗人員一定要不斷改進(jìn)并嚴格遵循實(shí)驗室操作流程,對實(shí)驗室不同操作進(jìn)行區域劃分,分裝試劑,定期對實(shí)驗儀器進(jìn)行滅菌,實(shí)驗室適當通風(fēng),養成實(shí)驗中進(jìn)行陰陽(yáng)對照的好習慣。當污染已經(jīng)出現,傳統的清除方法包括對可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡,紫外線(xiàn)照射,對反應液用DNaseⅠ或內切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對一些微量污染會(huì )有一定效果,但對污染效果不是很理想,而且紫外線(xiàn)照射會(huì )對人體造成一定的危害。近些年來(lái),一些生物試劑公司專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)研制出一些檢測清除核酸污染的試劑,這些試劑具有對人體無(wú)害,操作簡(jiǎn)單,省時(shí)等特點(diǎn),其中一些試劑只需噴灑在污染去經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的反應,擦除后便可清除污染。但這些產(chǎn)品還是相對傳統方法花費略高。
總之,對于核酸污染大家一定要給予足夠的重視,提前預防,不要等到污染已經(jīng)出現才想辦法清除,經(jīng)常在實(shí)驗室中配備清除污染的試劑,發(fā)現污染可馬上進(jìn)行處理,相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實(shí)驗人員頭疼的問(wèn)題。
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