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新品上市 | 耐高鹽全能核酸酶DENARASE? High Salt


DENARASE® High Salt 是一種經(jīng)過(guò)生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 內切酶,通常用于生物工藝中的 DNA 去除。與野生型 DENARASE® 相比,該酶的幾個(gè)氨基酸被替換以提高其耐鹽性,而不會(huì )失去其對核酸的特異性。DENARASE® High Salt 在更廣泛的鹽濃度和 pH 范圍內保持更高的活性,為客戶(hù)提供了更大的工藝靈活性,同時(shí)為病毒載體制造工藝提升成本效益,尤其是在需要較高鹽濃度的條件下由于與野生型核酸內切酶具有很高的相似性,DENARASE® High Salt 可以使用與野生型酶相同的核酸內切酶 ELISA試劑盒進(jìn)行檢測,例如DENARASE® ELISA試劑盒Cygnus核酸內切酶殘留檢測試劑盒(EonucleaseGTP ELISA貨號F960

 

DENARASE® High Salt的生產(chǎn)采用c-LEcta成熟的專(zhuān)利DENARASE®生產(chǎn)工藝,該工藝采用革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌菌株Bacillus.sp.表達大大降低了內毒素殘留風(fēng)險。該酶按照ISO 9001標準生產(chǎn),不使用抗生素和動(dòng)物源性原料或TSE/BSE風(fēng)險原料。

 

DENARASE® High Salt酶特性

DENARASE® High Salt是專(zhuān)為在更高、與工藝相關(guān)的鹽濃度下實(shí)現DNA清除活性而設計的。該工程酶在0-500 mM一價(jià)陽(yáng)離子濃度范圍內具有活性(見(jiàn)圖1)。

https://denarase.c-lecta.com/hs-fs/hubfs/Effect%20of%20Naci.png?width=2000&name=Effect%20of%20Naci.png

1. NaCl對酶活性影響

 

鎂離子(Mg2+)是確保DENARASE® High Salt發(fā)揮酶活性所必需的輔因子。DENARASE® High Salt低鎂離子濃度(5-25 mM Mg2+)下具有基本活性,但在高鎂離子濃度(>25 mM Mg2+)下酶活性會(huì )降低。因此,在使用DENARASE® High Salt時(shí),應確保鎂離子濃度在適當范圍內(見(jiàn)圖2)。

https://denarase.c-lecta.com/hs-fs/hubfs/Effect%20of%20Magnesium.png?width=2000&name=Effect%20of%20Magnesium.png

圖2. Mg2+對酶活性影響

 

 

DENARASE® High Salt質(zhì)量參數

DENARASE® High Salt產(chǎn)品為液體形式,配方為20 mM Tris-HClpH 7.4±0.2)、250 mM NaCl5 mM MgCl250%(體積比)甘油。

項目

方法

質(zhì)量標準

產(chǎn)品性狀

直接觀(guān)測

澄清透明液體

酶活性

光學(xué)測定1

>250 U/μL

純度

SDS-PAGE和銀染

≥ 99%

比活性

光學(xué)測定單位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩爾消光系數

>5 x 105 U/mg

內毒素

LAL-Test,參考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C

<0.25 EU/kU

總菌落數

TAMC/TYMC 參照 Ph. Eur. 2.6.12

需氧菌: < 5 cfu/200 μL

酵母: < 5 cfu/200 μL

1. Unit定義: 每個(gè)活性單位 (U) 指在37 °C ,pH 8.0 條件下,30分鐘內將鮭魚(yú)精DNA消化至相當于ΔA260nm值為1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。

 

DENARASE® High Salt產(chǎn)品參數


  • 分子量: 27 kDa
  • 最適pH: pH 7.4 - 9.0
  • 最適反應溫度:37 °C
  • 等電點(diǎn)(pI)7.831
  • 輔因子:Mg2+


 

DENARASE® High Salt訂購信息

品名

貨號

規格

DENARASE High Salt 25 kU

22002-25k

25 kU

DENARASE High Salt 100 kU

22002-100k

100 kU

DENARASE High Salt 500 kU

22002-500k

500 kU

DENARASE High Salt 1000 kU

22002-1000k

1000 kU

DENARASE High Salt 5000 kU

22002-5000k

5000 kU

 


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